中藥鑑別方法
正中藥質量的好壞、藥品的真偽優劣,直接影響醫療效果,而且危及到患者的生命安全。因此臨床上鑑別藥物真偽對保證用藥安全,提高醫療效果具有十分重要意義。那麼具體怎麼鑑別呢?下面小編為您呈獻詳細內容。
十九世紀至二十世紀,中藥鑑別最常用的“四大鑒定”。
1.基原鑑定,即中藥的原植***動***物鑑定,是應用生物分類學鑑定中藥的生物學來源,確定其正確的學名,這是中藥鑑定工作的基礎。
2.性狀鑑定,性狀鑑定就是應用看、摸、聞、嘗等方法,對中藥的性狀,包括形狀、 大小、色澤、表面、質地、斷面、氣味等特徵進行觀察,作為鑑別的依據,它是我 國中醫藥工作者長期的豐富經驗的總結,具有簡單、快速、直觀的特點,性狀鑑別主要是觀察完整的藥材及飲片。
3.,顯微鑑定,生藥的顯微鑑定主要是利用顯微觀察植***動***物生藥內部的細胞、組織結構及細胞內含物,描述顯微特徵,制定顯微鑑別的依據以鑑定真品、類似品或用品的一種方法。通常應用於單憑性狀不易識別的生藥,性狀相似不易區別的多來源生藥、破碎生藥、粉末生藥,以及用粉末、生藥製成的丸散片丹等,中藥成分製劑的鑑定。顯微鑑定是一種專門技術,需要有植物解剖、植物顯微化學的基本知識和顯微 切片的製作技術,顯微鑑定也是鑑定中成藥丸散片丹和制定品質標準的科學方法之一,對保證中成藥的質量,有一定的科學意義和應用價值。
4.理化鑑定,是利用中藥所含化學成分的某些物理性質或化學反應對中藥進行 定性和定量分析,一般應用於含不同化學成分、性狀相似而又無明顯顯微鑑定特徵的藥材。
常用的現代:
由於物理、化學、生物學和計算機的加速發展使儀器分析的手段不斷更新,紫外、 紅外、氣相、高效液相、核磁共振、掃描電子顯微鏡、計算機圖象處理分析、各種電泳、同功酶分析法、分子生物學技術、X射線衍射技術、差熱分析技術、聚類分析法等均被吸收到中藥鑑別的方法中來,大大的豐富了,形成了以“四大鑒別”法為基礎,以理化分析為重點,逐步適應中藥現代化並利於中藥走向世界的一套更為科學、完善、先進的中藥鑑別體系。
1.色譜法。色譜法是20世紀初產生,於60年代開始用於中藥分析,經逐步完善最後列入1977年中國藥典,並在以後各版藥典的中藥和成方製劑中的應用比例 迅速上升,成為中藥鑑別的最主要的方法之一。其理論基礎是上述的層析法,根據色譜法的分離方法可為紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法。
***1***薄層色譜法***TLC***。薄層色譜法用於生藥主要成分的定量測定,具有用量少, 方法簡便,適用範圍廣,重現性好等特點,除可將薄層上主要成分斑點刮取,經溶劑洗脫後進行測定外,也可在薄層柱上直接測定含量。當前應用較多的是薄層掃描法***TLCS***,由於不必洗脫等操作,因而方便快速,測量靈敏度高。
***2***高效液相色譜法***HPLC***。HPLC法由於具有分離效能高,分析速度快等優點, 近期已廣為普及用於中藥的定量分析,在中藥的定性鑑別中亦能發揮很好的作用。 ***3***氣相色譜法***GC***。氣相色譜法的流動相為氣體,稱為載氣,通常多用氮氣,具有高效、高選擇性、高靈敏度、用量少、分析速度快等優點。對於一些具有揮發性成分的中藥鑑別能發揮獨特的優點。如將氣相色譜與質譜聯用***GC/MC***,將經氣相分離的成分直接輸入質譜儀進行定性鑑別,這樣不但可知道不同中藥中揮 發性成分的差別,而且可知道兩者相同或相差的成分名稱。
2.光譜法,選擇某一波段波長,以此通過中藥的粉末或提取液,測定中藥對這一波段波長的吸收並記錄其吸收光譜,此為光譜鑑定中藥的原理。
***1***紫外光譜***UV***鑑定法,該法是根據中藥所含成分的不飽和程度有差異,因而導致其紫外吸收曲線的形態、峰位、峰強度亦異而以此達到鑑別的目的紫外光譜具有較高的靈敏度,因此,可用來檢查中藥製劑的純度和雜質的限量,是控制中藥製劑質量的重要手段,利用雜質的特徵吸收,可以很靈敏的檢測出微量雜質***10-5
g***的存在或控制主成分的純度。多溶劑紫外光譜法:在使用紫外光譜鑑定中藥時發現,一些親緣關係較近的藥材,由於成分相差不大,用通常的紫外光譜難以達到鑑別的目的,則可採用多溶劑紫外吸收,通過綜合比較其圖譜的差異,亦可獲得較好的鑑別效果。
***2***紅外光譜法***IR***。紅外光譜屬於分子吸收光譜,在中藥鑑別中具有制樣簡單, 實驗快和圖譜具有指紋性等優點,故應用較廣。
***3***熒光光譜法***FP***,中藥所含的某些成分在紫外光照射下吸收一定波長的能量後,又發射出比吸收光的波長更長的光即熒光,用熒光分析儀記錄在特定波長 照射下各中藥相同溶劑的提取液發射的熒光光譜,並比較其區別,也可達到中藥
鑑別的目的熒光法和薄層法相結合,即將中藥提取液先經薄層展開,再將薄層板 置於365nm或 254nm波長熒光下觀察,比較其斑點熒光的顏色和展開距離或將薄 層板置於薄層掃描器內,用適當的激發和發射波長進行掃描,可以得到各中藥的熒光掃描圖用於鑑別,這類方法對於一些含有能發射熒光成分的藥材尤為適用。
***4***核磁共振法***NMR***,類似於紅外和紫外光譜,是另一種形式的吸收光譜,在波長為10~100m的無線電頻率區域的電磁波照射分子,可引起分子中某種核的能 級躍遷,使原子核從低能態躍遷到高能態,此即核磁共振。由於中藥中的組分太複雜,通常選用某一溶劑的特徵提取物進行分析,獲得該中藥的HNMR指紋圖。
***5***質譜法***MS***。質譜是按照帶電粒子***即離子***的質量對電荷的比值大小依次排列形成的譜圖,當中藥提取液分子在質譜儀的離子源中以某種方式電離後,所形成的正離子在高壓電場作用下加速飛行,此時含有不同質量的離子束,經過質量分析,按質量與電荷比值的大小順序依次排列,然後採用照相方式或電學方式記錄,即可得到質譜圖。不同中藥提取液所含成分不同,所得質譜圖顯示的分子離子基峰及進一步的裂解碎片峰亦不一致,可資鑑別。本法準確、靈敏,對提取液中主要成分的含量要求較高,實驗費用亦較大,能否作為常用檢測方法尚待繼續探索。
3.差熱分析法***DTA***。研究樣品及參比物在相同環境下等速加溫時,兩者的溫度與時間或與加熱溫度的變化關係,分析的結果用熱譜圖表示。比較兩者熱圖譜的差 異,以達到鑑別中藥的目的,該法樣品用量少,只需數毫克或數十毫克,故對貴重藥材尤為適宜, 此外對於同屬不同種間的中藥鑑別也有很大幫助。
4.隨機擴增DNA法***RAPD***。不同種的生物甚至同種不同居群的植物,其DNA序列無法不相同,這為用DNA分析技術鑑定中藥提供了可能。
5.掃描電鏡技術***SEM***。利用掃描電子顯微鏡的高解析度,觀察立體感強,樣品製作簡單的特點,對細小藥材及葉類藥材進行鑑別
6.電泳法.依據中藥中的一些帶電荷的成分如有機酸、蛋白質、多肽、氨基酸、生物鹼和酶等,在一定程度的電場中,在相同時間內,因各中藥所含成分的電荷性 質***正電和負電***,電荷量和分子量等不同,造成各成分的泳動方向,速度和距離 等也不同,結合譜帶條數和染色結果不同,從而達到鑑別中藥的目的。按電泳操作中支援物的不同,可分為紙電泳,聚丙烯酞胺矽膠電泳,醋酸纖維薄膜電泳等,其中聚丙烯醯胺法在中藥鑑別中應用較多,該法所需試驗裝置簡單,專屬性強,靈敏度高。電泳法對含多肽和蛋白質類成分有差異的中藥鑑別有較突出的優勢,然而本法較易受實驗條件的影響,故必須嚴格把握實驗條件的一致性。