飼養層細胞是什麼

　　飼養層細胞的影響，主要體現在飼養層種類、絲裂黴素處理飼養層的時間、飼養層細胞的代數和飼養層細胞的密度等。下面是小編精心為你整理的飼養層細胞的介紹，一起來看看。

　　飼養層細胞的介紹

　　飼養層細胞就是指一些特定細胞***如顆粒細胞、成纖維細胞、輸卵管上皮細胞等已在體外培養的細胞***，經有絲分裂阻斷劑***常用絲裂黴素***處理後所得的細胞單層。一般鋪在明膠層上***也可不鋪***。飼養層細胞大部分可用MEF***小鼠胚胎成纖維細胞***。

　　不論ES細胞或EG細胞，原代或初期培養階段一般都需依賴於能分泌他們在體外存活增殖所必需的生長因子的飼養層細胞。不同型別的飼養層細胞分泌的生長因子略有不同，但都要求培養過程中的飼養層細胞不分裂不增殖而仍保持代謝活性。是細胞培養，尤其是胚胎幹細胞培養常用的生長增殖促進劑和分化抑制劑。

　　飼養層細胞的影響因素

　　飼養層的影響，主要體現在飼養層種類、絲裂黴素處理飼養層的時間、飼養層細胞的代數和飼養層細胞的密度等。動物種類不同對飼養層種類的要求也不同。

　　飼養層種類

　　STO PMEF：　對各種動物都較適宜，，但最可靠的方法還是根據動物種類篩選最佳飼養層為宜。有研究表明，PMEF比STO更適合用於小鼠ES***胚胎幹細胞***的培養。

　　UE***子宮上皮細胞***

　　BRL***大鼠肝細胞***等

　　動物種類

　　需要經過篩選來確定最適宜該種動物ES分離克隆的飼養層

　　絲裂黴素處理滋養層的時間

　　目前絲裂黴素***常用有絲分裂阻斷劑***處理時間在小鼠成纖維細胞上一般要求為：在37攝氏度，5%二氧化碳飽和溫度的條件下處理24h，時間過短達不到預定目的，成纖維細胞不能被成功地抑制住，時間過長則使細胞老化，活性下降，分泌因子的能力降低，從而直接影響ES細胞增殖和分化的抑制。同時處理完的清洗工作也很重要，一般要求用無鈣鎂PBS沖洗4~5遍，以確保絲裂黴素的徹底清除。

　　飼養層細胞的代數及密度

　　以小鼠成纖維細胞為例，選3~5代，密度為10^6-10^7個/ml為宜，代數過低所含雜細胞太多，代數過高則細胞活力降低。