大專醫學生畢業論文
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篇1
淺談紅芪多糖的純化及初步結構鑑定
論文摘要：目的研究紅芪多糖的分離純化及初步的結構。方法採用超聲輔助提取多糖，比較 Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-正丁醇法脫蛋白的效果，並用 GC、TLC及 IR分析多糖的初步結構。結果三氯乙酸-正丁醇法脫蛋白，經 Sephadex G-25柱層析分離純化後得紅芪多糖2***HPS-2***，HPLC確定為均一多糖，糖含量為 98.2%，糖組成分析表明其含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖，摩爾比為 .3∶.2∶2.7∶16.1∶2.。結論HPS-2是一種以 β苷鍵為主的吡喃型雜多糖。
論文關鍵詞：紅芪多糖; 薄層色譜; 結構鑑定
紅芪***Radix Hedysari***，為豆科巖黃芪屬植物多序巖黃芪Hedysarumpolybotrys Hand.-Mazz的乾燥根，為甘肅特產名貴藥材，在臨床上主要用於補氣固表， 利尿託毒， 排膿， 斂瘡生肌。紅芪中含有氨基酸、有機酸、β-谷甾醇、紅芪多糖、微量元素等眾多的生物活性物質[1]。近年來研究發現，紅芪多糖的活性成分具有增強機體免疫力、抗腫瘤、抗衰老、治療糖尿病等作用[1，2]。特別是我們近幾年的研究發現，經 7%乙醇沉澱部分藥理作用尤為明顯。由於多糖為大分子化合物，分離純化比較困難，而蛋白質的脫除是後期結構鑑定的關鍵之一，為了提高多糖的得率、純度及活性，本實驗對這部分多糖進行了脫蛋白方法的研究，結合TLC、GC、IR等方法對 HPS-2 的結構進行了初步的分析，以期為紅芪多糖的進一步研究提供理論基礎。
1 材料與儀器
紅芪，購自甘肅武都;牛血清白蛋白、考馬斯亮藍 G-25***西安周鼎國生物技術有限責任公司***;單糖對照品***中國藥品生物製品檢定所***;Sephadex G-25***上海長征製藥廠***;矽膠 G***青島海洋化工廠***;其它試劑均為分析純。
CR22G Ⅱ型離心機***日本日立***;UV-17 型紫外儀***日本島津***;GC-Clarus 5型氣相色譜儀***美國 PerkinElmer公司***;紅外光譜儀***Nicolet NEXUS 67***;BS-1A 自動部分收集器、HL-2 恆流泵***上海滬西分析儀器廠有限公司***;美國Waters6型高效液相色譜儀，配 Waters2414型示差折光檢測器。
2 方法
2.1 紅芪多糖的提取純化路線其流程如下。
2.1.1 提取紅芪藥材→粉碎→超聲脫脂→熱水提取3次→合併提取液→減壓濃縮後離心→取上清液→乙醇沉澱→有機溶劑洗劑→透析→減壓濃縮→冷凍乾燥得粗多糖 HPS。
2.1.2 純化粗多糖液→脫蛋白、色素→Sephadex G-25柱層析→洗脫液透析→濃縮→冷凍乾燥→精製紅芪多糖 HPS-2。
2.2 蛋白質和多糖含量的測定蛋白質含量測定採用考馬氏亮藍法[3]，多糖含量採用苯酚-硫酸法[4]。
2.3 脫蛋白方法
稱取一定量的粗多糖，加入適量蒸餾水，6℃加熱溶解，備用。本實驗採用 3種脫蛋白的方法。
2.3.1 Sevag法取粗多糖溶液，加入等體積的氯仿-正丁醇***V/V為 4∶1***試劑，混合振搖 3 min，離心除去沉澱，透析後醇沉，冷凍乾燥，即得脫蛋白多糖。
2.3.2 三氯乙酸法取粗多糖溶液，加入多糖溶液體積 .1倍量的三氯乙酸，低溫***4℃***劇烈振搖 3 min，離心除去沉澱，透析後醇沉，冷凍乾燥，即得脫蛋白多糖。
2.3.3 三氯乙酸-正丁醇法
取粗多糖溶液，加入等體積的三氯乙酸-正丁醇***V/V為 1∶1***試劑，振盪 1 min，靜置分層，收集下層水溶液，透析後醇沉，冷凍乾燥，即得脫蛋白多糖。
2.4 紅芪多糖的精製將一定量的脫蛋白多糖，溶解於適量蒸餾水中。過氧化氫除色素，減壓濃縮，經醇沉、離心、冷凍乾燥得紅芪多糖1***HPS-1***，取適量的 HPS-1，蒸餾水溶解後，Sephadex G-25柱分離，蒸餾水洗脫，流速 .8 ml/min，每 3 ml收集1份，苯酚-硫酸法跟蹤檢測，繪製洗脫曲線，合併主峰流出液，減壓濃縮至一定體積，冷凍乾燥得 HPS-2。
2.5 純度鑑定用 HPLC法，TSK-gel G25PW色譜柱，示差折光檢測器，流動相為雙蒸水，流速 1. ml/min，檢測器溫度35℃，樣品濃度4 mg/ml，進樣量5 μl。同時取該樣品溶液在 2～4 nm範圍內進行紫外掃描。
2.6 氣相色譜參照文獻[5]，多糖樣品經徹底水解後製備糖腈乙酸酯衍生物，以單糖的糖腈乙酸酯衍生物為對照品進行 GC分析。色譜條件: OV-11毛細管柱***5 m×. 32 mm***，載氣為N2 ，流速 5 ml/min，分流比 4∶1，FID氫火焰檢測器，汽化室溫度 25℃，檢測器溫度 28℃。程序升溫:11℃***保持 5 min***→***5℃/min***→ 28 ℃***保持 2 min***。進樣量 .4 μl。
2.7 薄層色譜[6]取 15mg HPS-2，三氟醋酸徹底水解，水解產物溶於 1 ml蒸餾水中，以標準單糖為對照，分別取樣品水解液和單糖對照液在含磷酸二氫鈉的矽膠G薄層板上點樣，上行二次展開，展開劑: 醋酸乙酯∶冰醋酸∶甲醇∶水=12∶3∶3∶2***V/V***;自然風乾後顯色，顯色劑: 苯胺-鄰苯二甲酸溶液，烘箱中 15 ℃加熱 5～1 min顯色。
2.8 紅外光譜測定 取 2 mg HPS-3，KBr壓片，測定紅外光譜。
3 結果
3.1 脫蛋白方法的選擇以蛋白脫除率和多糖損失率為指標，比較 Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-正丁醇法的脫蛋白效果***見圖1***。Sevag法的多糖損失率最低，但脫蛋白率也最低;三氯乙酸-正丁醇法的脫蛋白率最高，多糖損失率最低;三氯乙酸法的脫蛋白率達 3%以上，但多糖損失最高。綜合各方面的因素，本實驗選取三氯乙酸-正丁醇法脫除紅芪多糖中的蛋白質。
3.2 紅芪多糖分離純化紅芪多糖經Sephadex G-25柱層析純化分離的洗脫曲線***見圖2***。僅出現 1個洗脫峰， 收集主峰， 透析， 濃縮，冷凍乾燥， 得到 HPS-2。
3.3 純度鑑定HPS-2的紫外掃描在 26～28nm處吸收峰消失，茚三酮反應呈陰性，說明樣品中的蛋白質基本除盡，也無核酸存在;碘-碘化鉀反應呈陰性，表明樣品為非澱粉多糖;經 HPLC凝膠色譜後為單一對稱峰。表明其為均一組分;苯酚-硫酸法測定 HPS-2的糖含量為 98.6%。
3.4 紅芪多糖的結構分析
3.4.1 氣相色譜分析
氣相色譜分析***見圖 3***。比較標準品和樣品的保留時間，可見多糖 HPS- 2由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖5種單糖組成。其摩爾組成比例為 .3∶.2∶2.7∶16.1∶2.。
3.4.2 薄層色譜分析HPS-2 經薄層色譜***見圖 4***。檢出半乳糖***Rf對=Rf樣=.4***、葡萄糖***Rf對=Rf樣=.3***、阿拉伯糖***Rf對=.2，Rf樣=.19***、木糖***Rf對=Rf樣=.62***和鼠李糖***Rf對=Rf樣=.77***，其中木糖和鼠李糖含量較低，斑點不明顯。這與氣相色譜結果一致。
3.4.3 紅外分析從IR譜圖由圖 5可見，HPS-2在 3 6～3 2 cm-1、3 ～2 8 cm-1和 1 4～1 2 cm-1處均具有多糖的特徵吸收峰。1 154、1 8、1 24 cm-1處為 β-吡喃糖基的振動峰[7];898 cm-1為 β-糖苷鍵的吸收峰，82 cm-1處為 α-吡喃糖的吸收峰，說明多糖 HPS-2中存在 α和 β兩種型別的苷鍵，並以吡喃型糖為主。
4 結論
本實驗比較了3種脫蛋白方法，三氯乙酸-正丁醇法脫蛋白效果最好，脫除率達 37.2%，多糖損失率少。利用葡聚糖凝膠 Sephadex G-25柱層析分離純化紅芪多糖得 HPS-2，經 HPLC及紫外掃描為均一多糖，不含蛋白質和核酸。
GC、TLC及 IR分析 HPS-2的糖基組成和結構為，主要由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖5種單糖組成，其摩爾比為 .3∶.2∶2.7∶16.1∶2.，單糖主要為吡喃糖，異頭碳以 β型為主，並有少量的 α型。這為紅芪多糖的深入研究打下了理論基礎，特別為其組成的快速分析提供了可靠的方法。
參考文獻
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篇2
試談醫學教育實踐改革
摘要：醫學教育主要是通過理論教學和實踐教學來進行，通過理論知識的傳授、臨床技能和臨床思維的訓練，最終培養成能夠解決病患疾苦的合格的醫師。理論教學在整個培養過程中佔據絕大部分時間，理論授課形式對學生吸引力不夠，學生主動參與學習程度不夠，實際解決問題能力不強，這些都影響了教學效果。因此，針對現階段醫學教育存在的問題，在醫學教育中加強醫學教育改革，減少理論授課時間，增加實踐課教學時間，提高學生主觀能動性，加強師生之間教學互動，進而提升學生學習的主動性和積極性，提高教學質量和教學效果，在真正意義上提升學生解決問題的能力。
關鍵詞：醫學教育;實踐改革;探討
醫學專業學生的實踐能力培養是我國醫學教育的關鍵，也是最終目的。我國傳統的醫學教育存在重視理論知識的單一傳授，忽視學生動手能力和解決實際問題能力培養的問題。隨著醫學事業的發展，現階段的社會對醫學生的培養提出了更高的要求，需要在醫學教學中加強對學生實踐能力的培養，在課程的設定上增加實踐教學課時，減少不必要的理論授課時間。比如我國很多醫科大學建設了醫學技能培訓中心，將醫學教育中的理論教學、實踐教學和技能培訓進行結合，並相應配備了高技術的裝置和計算機培訓軟體系統，在計算機軟體的作用下將醫學操作和人體模型進行結合，在很大程度上滿足了醫學發展對醫學生培訓的需求。
1現階段醫學教育的發展現狀
伴隨我國高等教育的擴招，我國高等教學實現了由精英化教育向大眾化教育的轉變。高等醫學院校的招生人數不斷增加，但與之相匹配的教育投入卻沒有按照一定比例增加，在擴招的影響下，加劇了學生人數增加與投入教育資源不足之間的矛盾。醫學教育是培養學生診斷和治療疾病的教育，是高投入的教育，醫學實踐教學對提升醫學生的分析能力、實踐能力和創新能力具有重要意義。但在擴招的情況下，醫學教育面臨師資力量、教學經費不足、教學場所不夠等困境，使得醫院的實踐教學變得困難，情況不容樂觀。
具體體現在以下幾方面：第一，人才培養方案制定不合理，無法實現醫學教育培養目標。醫學教育不僅需要培養創新型人才，更需要培養能夠在各級醫療衛生機構中從事大量診療工作的醫師，只要這樣才能解決患者看病難、看病貴的現實問題。但在實際的醫學教育培養方案中，對學生實踐能力的培養，即在處理病人過程中分析問題、解決問題的能力培養明顯不足。學生理論知識豐富，動手能力差。
第二，招生人數急劇增加，但學校硬體和軟體設施不能相應增加，無法取得優質的教學質量。由於大學教育由精英教育向大眾化教育發展，以及部分經濟利益的驅動，幾乎每個大學都在擴招。這樣的後果就是，學生人數迅猛增加，學校的軟硬體設施沒有相應增加，而招收的學生整體素質是下降的，能力參差不齊。擴招後的醫學院校，由於在辦學資金、師資力量以及教學設施上存在限制，導致在實際教學中不能完全採用小班式教學，而更多的是採用大班式的理論教學。大班理論教學效果自然不如小班教學。
人數的增加與學生整體素質的下降加之教學效果下降自然影響最終畢業學生的素質和能力。第三，醫學院校附屬醫院實踐條件受限，患者自我保護意識增強，學生實踐機會減少。醫學院校的附屬醫院都是大型醫院，恰恰也是病人最多的醫院，往往是一床難求，臨床工作的醫師往往超負荷工作，在指導臨床實踐的實習生的時間和精力上都受到嚴重影響，指導學生實踐的效果自然受到影響。伴隨社會發展，醫療環境發生了變化，病人自我保護意識增強，傳統的和患者面對面的實踐教學面臨挑戰，更多病人不願意讓學生動手檢查和進行一些醫學處置。所以，學生實踐能力受到影響。而且由於擴招，最終在臨床上實踐的學生人數多，導致每個實踐學生管理病人的數量減少，所見疾病種類也減少。
2醫學教育實踐教學改革的策略
2.1制定合理的培養方案
醫學院校既要培養創新型高素質人才，以期他們去探索未知的許多醫學難題。也要培養更多實用型醫技人才，大量的醫療衛生機構需要他們去充實力量，大量的患者需要醫師去診斷和治療，這是解決看病難、看病貴，大醫院人滿為患的根本。因此，要因人制宜地制定培養方案，不搞一刀切。
2.2增加教育經費的投入
投入更多的教育經費，可以增加教師的數量，改善教師工作條件，提高教師教學能力。改善教學硬體設施，採用多媒體教學，採用更多小班教學，增加授課過程中教師與學生互動，變被動學習為主動參與，提高學生學習積極性。
2.3壓縮臨床課程理論教學學時，增加實踐課學時，改革學生成績考核方式
臨床課程理論教學屬於被動教學，老師講，學生聽，學生覺得枯燥無味，學習積極性不高，課堂死氣沉沉。學生喜歡實踐性強的內容，喜歡更接近臨床病人的內容。因此，增加臨床課程實踐教學學時等於提前進入臨床實踐。對影像專業核醫學課程，我們的改革就是將20學時的理論學時壓縮成14學時，實踐學時由2學時增加到8學時。改革評價學生成績的方式，將每次的作業、課堂紀律、考勤、期末考試成績綜合後作為本學期最終成績。經過這些改革，學生學習積極性明顯增強，自律性加強，學習效果越來越好，綜合素質得到提高。
2.4加強實驗技能中心和附屬醫院的建設，充分發揮實踐教學平臺的作用，對實踐過程進行嚴格規範
實踐教學是培養和提升學生實踐技能的根本，實驗技能中心和附屬醫院就是虛擬實踐和真實實踐的兩個平臺。醫學院校要從意識上重視醫學實踐的發展，為醫學實踐配置相應的教學裝置，實行完善的裝置管理措施，加強對實踐教學過程的規範。另外，有關人員還要加強對醫學實踐教學模擬軟體的開發，將先進的技術和理念運用到醫學教育實踐中。還要加強對醫學教育資金的投入，完善醫學教學平臺實踐教學環節的建設。醫學教學模式的選擇要根據醫學實踐教學改革面臨的問題進行建立，要重點突出模擬教學的地位，形成醫學教學質量評價的標準，對醫學實踐的管理模式進行創新，對教育實踐的過程進行優化。[1]
2.5加強對實踐教學的管理，完善相應的實踐教學制度，加強實踐教學質量的管控
針對原有重視理論課教學，忽視實踐課教學問題，醫學教學對原有的教學管理模式進行改革，強化實踐教學制度的建設，加強對實驗考核、實驗裝置以及實驗消耗的管理。在實踐課環節，要更多要求學生主動參與，分析醫學問題。在加強對實踐教學質量的管控方面做到以下幾點：
第一，加強對實踐教學計劃的管理。根據人才培養的目標以及學生具備的知識、技能，制定適合的實踐教學大綱。實驗教學設計要結合具體的醫學考試內容進行設計，建立一種不依附於理論教學的實驗教學體系，加強對實驗綜合性、創新性的關注。
第二，加強對實踐過程的管理。在實踐教學中要按照嚴格的要求組織實驗教學，特別是注意對學生獨立分析和處理問題能力的培養。加強對實踐教學的考核。[2]第三，加強對實踐教學質量的檢查。首先，要健全實驗課的考核評定方法，將學生對實驗課全過程的記錄作為對其最終考核的標準之一。其次，建立實驗聽課制度，加強學生之間的相互學習。最後，定期在網上對學生進行實驗教學評價調查，進而瞭解最新的實驗教學狀況。
3總結
綜上所述，伴隨醫學院的擴招以及社會發展對醫學人才的需要，醫學教育改革是醫學教育發展的必然需要。培養具有實踐技能的醫學高階人才是一個系統工程，因此，如何培養一個符合社會需要的醫學人才，需要各個醫學院校進行不斷的研究和探索。
參考文獻：
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篇3
醫學模擬教學在婦產科教學的應用
【摘要】探討用單項基礎技能訓練、綜合訓練的模擬教學模式在本科生婦產科教學中的應用，以達到提高醫學生臨床基本技能操作能力和培訓科學思維的目的。
【關鍵詞】婦產科;實踐教學;模擬教學
臨床實踐教學是醫學生學習掌握基本操作技能、培養臨床思維等能力的關鍵階段[1，2]。婦產科的操作大多涉及患者的隱私，而醫學模擬教育可以利用區域性功能訓練模型、模擬人、計算機虛擬模擬人，模擬臨床真實環境作為教學鋪助，達到提高學生臨床基本操作技能和培訓科學思維的目的。
1模擬教學在婦產科實踐教學中的應用
醫學本科生學習期間，要掌握基本的操作技能，如在婦產科，對患者子宮後穹窿的穿刺、輸卵管通液術、上環術、下環術及產前檢查等。可採用多元化示範為導向的模擬教學模式，用區域性功能訓練模型訓練學生，使其有效率地掌握相應的臨床操作技能[2]，熟練操作技巧[3]。示範教學是指教師與學生之間的互動性區域性功能訓練模型示範教學，該環節是以實驗技能為主的操作教學，教師先通過微視訊進行示範，讓學生了解基本操作要求，再有選擇的對一些重點、難點問題進行講解並示範操作[4]。各小組選擇代表先照樣練習，掌握要領後再向組內同學講解並在全班示範操作。學生在練習時，老師注意觀察，對關鍵部分要提示學生注意，隨時指出操作中的不足，並加以講解。
要給出充足的實踐操作時間，用於組內和組間的示範性交流，相互間進行評價，並可以拍攝視訊，收集教學素材，用於以後的實驗教學，活躍課堂的教學氣氛。在示範性教學中，要充分發揮微課、慕課等新教學手段的優點，利用好資訊化教學的優勢。區域性功能訓練模型能給學生提供反覆強化操作訓練的機會，讓學生能熟練操作技能。現有的高階綜合模擬人擁有強大軟體功能。
模擬人具有生理系統和功能體徵系統，根據實踐教學內容的要求，設定相應的引數，設計不同病情的“患者”，滿足各層次的醫學實踐教學的需求。此類綜合訓練模擬教學提高了學生的學習興趣和學習難度[5，6]。綜合訓練教學採用了啟發式教學、案例教學、小組討論式方法等多種教學方法。教師可以一星期前告知學生案例，學生事先做好預習準備。實驗室模擬人連線監護儀、呼吸機、麻醉機，學生可對模擬人進行觀察、做各種體格檢查、採集資料，在最短的時間內做出綜合分析和鑑別判斷[4]，實施相應的臨床診治方案。教師根據學生的診治表現給予指導和糾正錯誤，培訓醫學生的良好的臨床思維，提升現代醫學教學受訓學生的教學質量。
2醫學模擬教學的優點
2.1婦科患者病種多樣
學生可以通過模擬教學觀察到多種婦科疾病，特別是臨床上少見疾病的特徵[6]，學生可直接進行體格檢查和操作，熟悉各種婦科疾病患者的診治。
2.2通過模擬教學反覆練習
學生在模型上重複練習[6]，能較好的掌握操作要點，直到技能熟練，如婦科患者子宮後穹窿穿刺術、診刮術、會陰側切縫合術等。
2.3模擬教學安全性強
在帶教教師的指導下直接在患者身上進行操作，如助產術，存在一定的安全隱患。病史採集不熟練及診治時間急促，易引發患者不良情緒，可能觸發醫患矛盾。而模擬教學利用模擬系統直到學生進行練習，避免此類問題的發生[7，8]。在婦產科的本科生教學中，模擬教學創造了一個安全、貼近真實臨床的教學環境，同時也必須認識到，模擬教學不能完全代替臨床實踐床旁教學。
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