山東畜牧獸醫職業學院畢業論文

　　山東獸醫職業教育體系的建立和完善，獸醫人才培養目標的確立，獸醫人才培養模式改革，不僅受國家教育制度的影響和調控，同時也受到畜牧業發展水平和國家獸醫體制的影響。下文是小編為大家蒐集整理的關於的內容，歡迎大家閱讀參考!

　　篇1

　　淺析幾種常見的禽流感新型疫苗

　　禽流感***avian influenza,ai***是由a型流感病毒引起的一種禽類疾病綜合徵，被世界動物衛生組織***oie***列為最危險的動物疫病之一，可在家禽、水禽、野生鳥類和哺乳動物中廣泛、迅速地傳播。由於流感病毒本身極易發生變異，且ha和na的組合理論上有198種之多，而機體內缺乏針對所有亞型和新型病毒的特異性抗體，造成了流感大流行的頻繁發生。

　　自從1878年首次報道禽流感以來，在世界範圍內廣泛存在，不僅給養殖業造成巨大的經濟損失，還給人類的生命安全帶來了嚴重威脅[1].1997年在香港，人類第一次感染h5n1亞型禽流感病毒***avian influenza virus,aiv***，在確診的18名感染者中，有6人最終死亡[2].近年來，aiv跨越種間障礙由動物感染人類的事件時有發生，僅2013年就有3種新型aiv突破種間屏障感染人類，分別是h7n9、h6n1和h10n8亞型aiv.其中，感染h7n9和h10n8亞型aiv後的死亡率分別約為20%和66%[3].

　　目前，疫苗接種仍是防控禽流感最有效的手段[4].傳統的全病毒滅活疫苗早在50多年前就被批准使用，而且在禽流感的防控中發揮了重要作用。

　　但在世界範圍內，禽流感疫情仍然時有發生，並導致易感動物的感染和死亡[5-7].aiv的不斷演化及新病毒的出現使現有疫苗的效力降低甚至失效[8].因此，每年都要對疫苗進行更新使其能抵抗流行毒株引起的疫情。儘管如此，仍然存在很多問題，如疫苗效力低下、在幼小動物和高齡動物中存在安全風險、接種劑量大等。且傳統疫苗受制作工藝的限制，免疫效力受儲存和使用環境的影響，接種後的副作用也會對疫苗的免疫效力產生不同程度的影響[9].因此，研製新型禽流感疫苗，加強對禽流感的防控，一直是科研人員關注的焦點。作者就幾種常見的禽流感新型疫苗進行綜述，旨在為禽流感的防控提供參考。

　　1 重組活載體疫苗

　　重組活載體疫苗是利用基因工程的方法，將aiv中具有免疫原性的基因片段整合至對禽類致病力較弱的病毒或細菌載體中製成的疫苗。抗原基因隨著病毒或細菌在機體內的複製而持續表達，從而誘導機體產生針對抗原蛋白的免疫應答。與傳統的滅活疫苗相比，重組活載體疫苗用量少，抗體持續時間長，且不需要新增佐劑，但其安全性還有待提高。

　　目前，使用最多的病毒載體主要有痘病毒、腺病毒、新城疫病毒和桿狀病毒。其中，痘病毒結構簡單，可容納大片段外源基因並具有較高的表達效率[10],因此得到了廣泛應用。痘病毒作為疫苗載體首先應用於1982年，科學家將皰疹病毒的胸苷激酶基因整合至牛痘病毒中併成功表達出具有功能的蛋白。1983年，攜帶h2n2亞型流感病毒ha基因的重組牛痘病毒構建成功，該重組病毒可以在兔和倉鼠體內誘導產生免疫應答。隨後，流感病毒的10個主要蛋白在牛痘病毒中成功表達[13-14].但直到今天，重組痘病毒疫苗仍只在獸醫領域使用，已批准使用的包括以雞痘病毒和金絲雀痘病毒為載體的禽流感和馬流感疫苗[15-16].表達aiv ha基因的痘病毒載體疫苗除了可抵抗aiv的攻擊以外，還可對禽痘病毒感染提供保護。

　　構建了同時表達h5n1亞型aivha和na基因的重組雞痘病毒rfpv-ha-na,用該病毒免疫spf雞可對h5n1和h7n1亞型aiv提供完全保護。隨後，喬傳玲[18]對rfpv-ha-na的最佳免疫劑量、免疫日齡、免疫產生時間等做了進一步測定，結果發現約含100pfu的重組病毒就可對強毒感染提供完全保護，對1日齡spf雞接種4周後能對強毒攻擊提供完全保護，重組病毒在免疫10個月後仍可對強毒攻擊提供100%的保護力。

　　2012年墨西哥暴發的h7n3亞型禽流感疫情中，採用重組活載體疫苗和滅活苗共同免疫的方法，使發病率和死亡率均顯著降低。接種中採用的重組活載體疫苗來源於一株重組雞痘病毒，該病毒攜帶有低致病性禽流感h7基因[19].ge等[20]以新城疫病毒la sota株為骨架，構建攜帶h5n1亞型aiv ha基因的重組病毒，該病毒接種雞後能同時對速髮型新城疫病毒和高致病性aiv提供保護。王偉[21]構建了表達h5n1亞型aiv ha基因的重組腺病毒，將該重組病毒以適當劑量免疫小鼠和spf雞後，均可對致死劑量h5n1亞型aiv的攻擊提供100%保護。

　　2 基因工程亞單位疫苗

　　禽流感亞單位疫苗是將aiv中具有免疫原性的基因通過真核或原核表達，將表達的蛋白進行純化後加入適當佐劑製備而成。亞單位疫苗本身不具有感染性，因此有很高的安全性，能刺激機體產生足夠的免疫力。目前，病毒主要保護性抗原ha、na和np蛋白是禽流感亞單位疫苗的主要研究物件。

　　其中，ha是構成aiv囊膜纖突的主要成分之一，是aiv的一種表面糖蛋白，可誘導機體產生體液免疫應答，是aiv抗原變異和病毒致病力的主要決定因素[22],因此，在禽流感基因工程亞單位疫苗的製備中被廣泛使用。

　　利用桿狀病毒表達系統表達h5n1亞型aiv的ha蛋白，加入弗氏完全佐劑製成疫苗後免疫spf雞、商業用雞和balb/c小鼠，結果發現，該疫苗可誘導產生抗體反應且對spf雞和商業用雞提供完全保護，以2μg的劑量免疫7日齡雞兩週後可產生保護性免疫，血清抗體可持續6個月，而免疫balb/c小鼠後同樣可抵抗aiv的致死性攻擊，說明該疫苗具有成為控制禽類和哺乳動物流感候選疫苗的潛力。

　　kodihalli等[24]研制的火雞h5n2亞型aiv ha和np複合亞單位疫苗免疫火雞21d後可產生較高的抗體滴度，並且可檢測到t細胞增殖和遲髮型過敏反應，說明該疫苗可誘導體液和細胞免疫應答，而隨後的攻毒試驗結果表明，該疫苗可以對同源和異源***h6n1***亞型aiv的攻擊提供保護。李賀等[25]利用桿狀病毒表達系統獲得h7n1亞型aiv ha蛋白後，加入弗氏完全佐劑製成疫苗，以20μg/羽的劑量免疫spf雞，兩週後進行加強免疫，加強免疫兩週後的攻毒試驗結果表明該疫苗對同源aiv攻擊的保護率為100%,攻毒後取咽拭子和洩殖腔拭子並未分離到病毒。張新濤等[26]將h5n1亞型aiv的m2e蛋白製成疫苗後免疫spf雞和balb/c小鼠，攻毒後雖可對aiv的攻擊提供一定的保護，但保護率較低，可能是因為與ha相比，m2e的免疫原性較低。

　　傳統的亞單位疫苗通過分離免疫原性強的蛋白亞單位制備而成，該方法操作複雜且成本較高，制約了亞單位疫苗的大規模生產[27].隨著基因工程和分子克隆技術的發展，可將抗原基因連線到載體質粒，隨後藉助於各種表達系統可獲得大量具有免疫原性的蛋白亞單位，從而實現基因工程亞單位疫苗的大規模生產。但由於大多亞單位疫苗提取的是單一的抗原蛋白，誘導的免疫反應強度還有待提高，這是今後的禽流感亞單位疫苗研究需要解決的問題。

　　3 dna疫苗

　　dna疫苗又稱為基因疫苗或核酸疫苗，是依靠現代分子生物學技術發展而產生的一種新型疫苗。

　　20多年前，科學家證實，直接注射可編碼免疫相關基因的真核表達質粒即可誘導機體產生免疫應答[28].其原理是利用基因工程的方法將病毒的保護性抗原基因整合至真核表達質粒，在靶細胞中，抗原基因得以表達，從而刺激機體產生特異性的體液和細胞免疫反應[29].相比於傳統疫苗，dna疫苗具有多個優點：①dna疫苗更加安全、穩定，且生產成本低、易於操作;②可同時誘導產生體液免疫和細胞免疫，且抗體持續時間長;③dna疫苗具有熱穩定性，易於儲存和運輸;④將攜帶不同抗原基因的真核表達質粒混合可製成廣譜疫苗，抵抗多種病毒的感染;⑤dna疫苗免疫只表達一種或幾種抗原蛋白，接種時沒有潛在的感染風險[30-31].

　　張強哲等[32]構建了可表達h5亞型aiv ha基因的重組表達質粒pc4h5和pcmvh5,採用電擊法免疫小鼠和spf雞後，均能對h5亞型aiv的攻擊提供完全保護。有研究認為，流感病毒ha、na、m1、np和ns1等基因均可用於dna疫苗的生產[33],但多數採用ha基因。基於m2e基因的dna疫苗誘導的免疫保護力雖然低於基於ha基因的dna疫苗，但m2e基因具有在a型流感病毒中高度保守的序列，因此m2edna疫苗有可能在廣譜疫苗的研發中發揮重要作用。據此，park等[34]構建了攜帶h1n1亞型aiv ha和m2e基因的融合質粒，免疫動物後用h5n2亞型aiv進行攻毒試驗。結果發現，融合質粒可對h5n2亞型aiv的攻擊提供完全保護，且保護效果要高於只含有ha或m2e基因的質粒，表明用融合質粒構建的疫苗具有交叉保護性。

　　儘管與傳統疫苗相比dna疫苗具備諸多優點，但曾經有報道指出，肌肉注射免疫dna疫苗在攻毒前並不能誘導產生可檢測到的hi抗體[35],而在chen等[36]的研究中卻得到了不一樣的結果。其將一株h5n1亞型aiv的ha基因克隆至載體pci上構建了疫苗質粒pciha,分別以100和50μg/羽的劑量肌肉注射免疫3周齡的spf雞，一免兩週後進行加強免疫，加強免疫兩週後以10ld50進行攻毒試驗。結果顯示，一免兩週後的hi抗體滴度分別為25.8±2.0和24.7±2.5,加強免疫兩週後的hi抗體滴度分別為28.4±2.7和27.6±3.9,攻毒一週後hi抗體滴度分別為29.6±2.2和29.0±2.4,且攻毒後雞不死亡、不排毒、無臨床症狀，表明dna疫苗可引起高水平的hi抗體反應並誘導對致死性aiv攻擊的完全保護。

　　4 病毒樣顆粒疫苗

　　流感病毒血清型眾多，根據ha和na抗原性上的差異，a型流感病毒又可進一步分為18個ha亞型和11個na亞型，這給禽流感疫苗的研發帶來了巨大的困難，病毒樣顆粒***vlp***疫苗為這一難題提供瞭解決辦法。

　　vlp是含有某種病毒一個或多個結構蛋白的顆粒，具有完整病毒的免疫原性而不含病毒核酸，因此可誘導產生免疫應答但不能自主複製。vlp疫苗具有諸多優勢：①vlp疫苗不含病毒核酸，在使用過程中不會發生病毒的基因重組，因此具有很高的安全性;②vlp可被抗原遞呈細胞捕獲，因此可誘導機體的細胞免疫;③vlp疫苗成本低，生產週期短，給疫苗的大規模生產提供便利;④vlp可應用多種表達系統生產，如桿狀病毒表達系統、大腸桿菌表達系統、酵母表達系統和哺乳動物表達系統，擺脫了傳統疫苗對雞胚的依賴，保證了禽流感大流行時疫苗的供應;⑤vlp疫苗更加穩定，不易失活[37].上述優勢使vlp疫苗成為近幾年研究的熱點。

　　在上述vlp表達系統中，應用最廣的是桿狀病毒表達系統。桿狀病毒表達系統在表達外源蛋白方面具有明顯優勢，易於篩選，蛋白表達水平高，成本低，易於外源蛋白的大規模生產且具有很高的安全性，更重要的是，使用該系統表達的蛋白保持了原有的生物活性，保留了原有的免疫活性[38].王立強等[39]構建了能共表達h5n1亞型aiv ha、na、m1和m2蛋白的桿狀病毒，並在昆蟲細胞中組裝成病毒樣顆粒，該vlp的形態與aiv一致且具有血凝活性。

　　黃曉媛等[40]對h5n1亞型禽流感vlp與全病毒滅活苗進行了體液免疫和細胞免疫的比較，免疫小鼠後發現，vlp和全病毒滅活苗均能使小鼠血清igg效價升高且vlp免疫劑量達到200ng/只後可對病毒攻擊提供完全保護，cd4+t細胞和cd8+t細胞的比例較正常小鼠均升高且與免疫劑量呈正相關，表明h5n1亞型aiv vlp可誘導機體的體液免疫和細胞免疫。

　　novavax公司於2005年利用bac-to-bac昆蟲桿狀病毒表達系統研製成含有h9n2亞型aiv ha、na、m1蛋白的vlps疫苗，經對比試驗表明該疫苗具有很好的免疫原性和保護力，可作為流感大流行時的備選疫苗[41].

　　5 結語

　　進入21世紀以來，全球範圍內暴發了多起禽流感疫情，對養殖業造成了極大的影響。不僅如此，aiv跨越種間障礙感染人的事件也越來越多。2013年暴發於中國的h7n9亞型禽流感在短時間內造成了132人感染、37人死亡的嚴重後果。由此可見，防控禽流感不僅關係到養殖業的健康發展，更是與人類的生命安全息息相關。研製快速而有效的禽流感疫苗一直都是人們關注的焦點，而除了疫苗本身以外，製作疫苗過程中使用的佐劑、疫苗的接種途徑及其他可能影響免疫效果的因素同樣值得關注，只有達到最佳的組合才能獲得最好的免疫效果，這樣，在面對禽流感疫情時才能更加從容。

　　參考文獻：

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　　篇2

　　淺談豬慢性腸炎疾病的病因、症狀和診治

　　最近幾年，祿勸縣豬經常零星發生豬一種豬病，特徵是食慾減退，不食或少食，病程較長，大約可持續30～40 d，有的自然好轉，形成僵豬;有的病情加重死亡，死亡率達65%。該病多發生在秋末冬初，各類豬群均易發生，但以架子豬發病率較高。經筆者調查診斷，確診為豬慢性腸炎疾病。

　　1、病因

　　1.1環境因素

　　養殖場缺乏科學規劃，圈舍排汙、採光條件差，採光不足，排汙不通暢，圈舍儲積大量糞汙，空氣溼度大，病菌大量繁衍。

　　1.2飼養管理不當

　　不按時飼餵，供給飼料不均勻，時飽時餓，突然改變飼料或不小心餵了發黴變質飼料，導致豬消化系統功能紊亂，抗病能力減弱而發病。

　　1.3濫用抗生素

　　有的養殖戶為了預防疾病發生，長時間在飼料中投入多種抗生素，如土黴素、氟哌酸等，導致豬消化道的菌群失調而發病。

　　2、症狀

　　***1***體溫稍有升高，大約在39℃～40.5℃，鼻鏡、耳尖乾燥開裂萎縮，被毛雜亂無光澤，走路搖擺，弓背夾尾。

　　***2***病初，眼結膜潮紅，眼球凹陷無光;後期眼結膜發黃。

　　***3***排便次數減少，糞便呈小球狀，乾硬惡臭，糞便上附有濃性腸粘膜，尿液少，呈深黃色。

　　3、診療方法

　　3.1西醫療法

　　方1：大黃藤素，劑量：0.2～0.3 ml/kg體重·頭。青黴素，劑量：5～10 iu/kg體重·頭。地塞米松，劑量：0.01～0.05 ml/kg體重·頭，2次/d，連用5 d。

　　方2：肌肉注射鹽酸氧氟沙星注射液，劑量：0.1～0.3 ml/kg體重·頭，2次/d，連用5 d。

　　3.2中醫療法。

　　山楂30 g、麥芽30 g、神曲30 g、大黃粉30 g、火麻仁30 g、芒硝30 g、糯米100～200 g，水煎服，2次/d，連用7 d。

　　4、預防措施

　　***1***確保養殖場及圈舍清潔衛生，適時清除糞汙，定期消毒，圈舍適當採光和空氣流通。

　　***2***加強飼養管理，定時定量飼餵，不能隨意更換飼料，同時要管好飼料，防止飼料發黴變質及用發黴變質的飼料飼餵。

　　***3***適當新增多汁青綠飼料和杜絕隨意在飼料中新增抗生素。

　　***4***在飼養過程中要注意觀察豬的精神及採食等情況，若發現豬有異常症狀，要及時請獸醫診斷治療。

　　5、小結

　　筆者採用上述方法醫治豬慢性腸炎47例，治癒44例，治癒率達94%，治療效果較好。

　　篇3

　　試論中職畜牧獸醫專業教育教學

　　摘要：隨著人們生活水平的提高，人們對動物群的生存和健康發展也越來越關注，因此，獸醫專業也得到了較快的發展。在中職院校中，畜牧獸醫專業的培養計劃有其特殊之處，其和高等院校存在著很大的不同，它更加重視實踐應用能力，重點培養具有實踐操作能力的綜合性人才。但是，培養人才的實際過程中，很多中職院校過多重視理論教學，未能充分提高學生的實踐操作能力。對此，教師應根據中職畜牧獸醫專業教學的實際情況，提出優化的措施。

　　關鍵詞：中職;畜牧獸醫;教學;優化措施

　　隨著經濟建設的發展，我國畜牧業也得到了長足的發展，人們生活水平得到了極大的改善，因此也對畜牧業的質量提出了更高的要求。所以，畜牧獸醫專業得到了越來越多人的青睞。中職院校主要是為了培養高技能的人才。就目前人才培養的情況來看，存在很多不合理的地方，比如對理論教學比較重視，不利於提高學生的實踐操作水平。因此，要優化中職畜牧獸醫專業教學的策略。

　　一、中職畜牧獸醫專業教學的現狀

　　大部分中職學校仍然採用傳統的管理模式，教材的內容已經陳舊，很久沒有改動，難以適應當前社會發展的要求。而且，在教學的過程中，教師作為課堂活動的中心，他們的講授佔據了幾乎全部的時間，學生的學習興趣不高。另外，課程設定不夠合理，教學方式比較落後，尤其是實訓基地的建設存在諸多的問題，比如基礎裝置落後，學生缺乏實踐等。此外，中職學校畜牧獸醫專業的教師資源也不夠壯大，很多教師都是轉行而來，他們長期脫離社會實踐，對社會的需求瞭解不足。學校對學生的評價仍然限於考試的形式，輕視實踐，學生的專業素質不高，增加了學生就業的壓力。

　　二、畜牧收益專業的理論教學優化

　　***一***培養學生的學習興趣

　　在中職畜牧獸醫專業教學中，學生首先要培養自己學習的興趣，才能更好地參與實踐活動。中職學校要想優化理論教學的內容，就要重視培養學生對畜牧獸醫專業的濃厚興趣。教師在課堂中，要鼓勵學生主動參與，敢於提出質疑，針對教材設定一些相關的問題，同時還要適當瞭解學生的業餘時間。這樣可以保證聽課的高效率，保證良好的課堂效果。另外，在開展教學工作時，教師要有針對性。中職學校學生的年齡較小，而且注意力比較分散，想象力比較豐富，他們具有自身特定的思維方式，所以，教師要對學生的具體情況進行充分的瞭解，在課堂中引入恰當的學習方法進行講授，從而激發學生的學習興趣。最後，教師可以依據課堂的要求，創設一定的教學情境，提高課堂活動的效率。

　　***二***利用現代化的教學手段

　　在中職畜牧獸醫專業中，傳統的教學方式主要是將板書和掛圖相結合，其手法比較單一，而且學生往往興趣不高。隨著現代社會的發展，各種新技術也逐漸在教學中採用，比如多媒體技術等。這種教學方式可以在一定程度上克服傳統教學方式的弱點，給以學生更加生動、形象的直觀效果。同時，學生也會產生濃厚的興趣，增強學習的熱情。因此，對於中職畜牧獸醫專業的教師來說，要不斷適應時代發展的要求，尤其是要掌握現代科技技術的應用，可以採用聲音、影象、動畫、視訊等多種表現形式，豐富教學形式，增強教學活動的感染力，同時可以活躍課堂氛圍，拓展學生的知識面，更有助於提高學生的專業素質。

　　三、畜牧獸醫專業的實踐教學優化

　　***一***優化教學環節

　　在中職畜牧獸醫專業中，要重點突出實踐教學。通常來說，中職畜牧獸醫專業可以分為：備課、授課、學習指導、實踐報告稽核、評定成績等。在每個教學階段中，首先要制定相應的教學規章制度和規則。比如，教師在備課時，要保證教學的規範性，要闡釋原理、使用的方法和器械，並做好實踐記錄等工作。而當處於教學指導環節時，教師要對學生的實踐過程進行檢查，針對學生提出的問題，教師要及時給予解答，要及時檢查機械裝置發生的故障，同時要提高學生應對突發事件的能力。另外，對於學校來說，其要制定一定的考核制度，加強對教師的考核，及時瞭解教學中存在的問題，提高教師的專業素質，從而更好地開展教學工作。

　　***二***優化使用的教材

　　中職教育主要是為了培養學生的實踐能力，因此，在新的改革背景下，要不斷優化教材。教材要具備幾個方面的特點：***1***新。新主要是教材的使用要和時代的發展要求相適應，並且對教材中滯後的內容進行糾正。***2***實。實主要是指教材的內容既能夠推動教學工作的開展，還要將其與目前企業發展採用的技術、裝置密切結合，從而可以使學生和企業接軌。***3***變。變主要是指教材要隨著時代的變化而變化，由於現代科技發展較快，而且裝置更新也較快，所以，可以有效提高學生的學習技能，充分滿足社會的需要。對於中職畜牧獸醫專業來說，要想優化其教材的內容，可以從以下幾個方面著手：***1***要合理選擇教材。因此，需要從目前現有的教材中合理選擇，確保教材能夠符合理論的內容，又能夠推動實踐教學的需要。***2***要加強對教材的編制工作。教師要依據目前學生的實際情況，保證教材內容符合學生的接受情況。***3***在實踐教學的過程中，明確學生需要實現的教學目標，但是不提供具體的教材，促進教學質量的提高。

　　***三***建設實訓基地

　　中職教育主要是為了培養學生的實踐操作水平，學校要強化實訓基地的建設，並將其作為工作的重中之重，從而可以使學生得到更多實踐操作的機會。在建設基地的過程中，要進行恰當的規劃，還要加強對人員和隊伍的管理，壯大教師的隊伍，採用先進的裝置和技術，高效利用資源等。為了更好地優化教學資源，在實訓基地中，教師可以加強對學生的集中管理，從而充分利用各項資源，合理調配人、財、物。

　　***四***強化學生的管理

　　要加強對學生的崗前培訓，增強他們的責任意識，培養他們的職業責任感，使他們積極適應工作的環境。同時，在教學的過程中，教師要強化基本理論、技能等的學習，給學生恰當的指導，並給予學生更多實踐的機會，提高學生自主解決實際問題的能力。總之，中職畜牧獸醫專業教學的現狀不容樂觀，過度重視理論教學，教材內容比較陳舊，不利於提高學生的實踐操作水平。因此，教師要從理論和實踐上優化中職畜牧獸醫專業教學，不斷提高學生的知識水平和技能水平，促進中職教育的發展。

　　參考文獻：

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