免疫熒光技術論文
免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。下面小編給大家分享一些,大家快來跟小編一起欣賞吧。
篇一
免疫熒光技術在臨床檢驗中的應用
【中圖分類號】R46【文獻標識碼】A【文章編號】1672-3783***2012***11-0347-01
【摘要】:目的是瞭解免疫熒光技術在臨床檢驗中的應用及其發展方向。免疫熒光技術又被叫做熒光素技術,顧名思義,是用熒光素標記技術對抗體或抗原進行標記,然後用於免疫學測定,免疫熒光技術是利用物質吸收光能會發光的特性來研究的。我國的熒光抗體技術, 多用於病原微生物的診斷,60年代隨著熒光抗體極大的進步,顯著地提高了熒光抗體的敏感性和特異性,這一技術在自身免疫病和抗原免疫組化定位等方面都得到了廣泛的應用。在本文,以免疫熒光技術的臨床表現為案例,分析其特點,方法主要有熒光抗體技術、熒光抗體染色法、熒光間接染色法。結果是:通過對免疫熒光抗體技術的研究,分析出其各種優缺點,在以後的醫學運用中能夠著重利用。
【關鍵詞】:免疫熒光技術熒光抗體基本運用基本型別
一目的
目的是通過研究免疫熒光技術的方法瞭解其在臨床中的應用及其發展的方向,通過熒光抗體技術、間接熒光抗體染色方法、免疫熒光法等幾種方法的介紹,瞭解熒光技術的發展,並且瞭解其優缺點,並且對免疫熒光技術的具體在臨床中的應用也作出了列舉,使能夠在以後的臨床運用中避免和其缺點的碰撞而利用其優點的地方。
二資料
本分析共有20例患者,年齡分佈在25-37歲,平均年齡為32歲,其中9例為甲型鏈球菌患者,5位是寄生蟲感染的患者,6位腫瘤病毒患者,在近期的一個月內沒有使用過激素的病人,在此類人中,無精神病患者和心臟功能衰弱患者,選擇病例嚴格控制,我們確保被研究者都符合條件,確保本次對免疫熒光技術的實驗結果的準確無誤。
方法:熒光抗體技術、間接熒光抗體染色方法、免疫熒光法來分別比較其優缺點和其檢測效果的運用。
三結果
熒光抗體技術在臨床試驗中已經用於對細菌和病毒等的診斷上,針對通過的方法鑑定主要通過這幾方面說一下其結果。對於細菌的檢驗,其材料可以是培養物或者感染組織,這種方法叫其他來說能夠看到普通光學顯微鏡看不到的病毒。在對寄生蟲診斷上,間接熒光體技術運用廣泛。對於自身免疫疾病的實驗診斷中,對免疫熒光技術的運用較為廣泛。對於熒光抗體技術的運用主要是分析流式細胞分析,能夠檢測出所測細胞的大小、拆散率等。
四討論
免疫熒光技術現在已經被廣泛應用到了醫學和生物的許多方面,那麼在本文中,研究免疫熒光技術在臨床中的具體運用表現有哪些呢?大致從以下幾種角度考慮:
1在細菌診斷中 免疫熒光技術在這裡主要是用於對細菌和抗原結構的研究,例如甲型鏈球菌,能夠利用這項技術做出快速的分析和判斷。
2在寄生蟲學中利用免疫熒光技術,在這方面的主要表現是對於瘧原蟲、鉤蟲、蠕蟲等的研究,主要是針對這些寄生蟲感染的免疫學的機理方面的研究。
3在病毒學中免疫熒光技術在臨床中應用最廣的領域主要是對病毒學診斷,這主要研究與器官細胞的定位,此外還有對感染、腫瘤病毒的研究,一般研究表現是通過對血清中抗病毒的抗體研究來檢測對脊髓灰白質炎或者狂犬病等。
4在免疫病理中 在臨床中對免疫病理的運用主要是通過跟蹤法檢查對於球蛋白在沉澱中的開展情況,比如說對於天胞瘡,一般會隱藏在真皮的基底膜中,對於一些隱性的病症也會要通過補體熒光的鑑定來測定其位置。
免疫熒光技術的運用還表現在對血液中B和T細胞的鑑定,在具體運用中對於器官移植的鑑定也有所涉及,此外還有對於組織中免疫球蛋白及補體組分的檢測等等。
在研究免疫熒光技術的臨床表現的同時,進一步需要的研究就是對於免疫熒光技術的基本型別,針對這點的研究,可分為以下幾種型別:
1直接法這主要是利用熒游標記的特點,並且將其和與之相應的抗體結合,從而來鑑定相對未知的抗原,這種操作方法簡易靈活,但缺點是針對範圍比較侷限。
2間接法 這是利用免疫熒光抗體能夠標記抗免疫球蛋白的作用來鑑定的,在具體操作中首先,用已知的抗體和抗原反應,然後增加免疫球蛋白抗體,可以看出形成的複合體能夠就其發光部位來判斷,這種方法的優點是敏感性高,但缺點也存在抗體純度不高,容易受非特異性熒光的干擾影響效果。
3、補體法 這是針對熒游標記抗不抗體,能夠來對照抗原或抗體的原理反應,在具體操作中,首先已知抗體或未知抗原的反應,然後將其補充正常人體中新鮮血清,準備就緒後加入熒游標記抗體,可以看到在這裡利用熒光抗體和其溶解的結合。這種方法只需將熒光抗體就能夠得知系統中的其他抗原,但其缺點存在不穩定性,需要固定的抗體才能與之結合,不然會導致實驗的失敗。
4、雙標記染色法 這種方法主要是針對免疫熒光技術能夠將兩種不同抗原在同一標本內分別染色的特點對其研究,在具體運用中,一般是將呈黃綠色熒光和成色熒游標記在不同的兩種抗體中,在抗體中的不同顏色能夠清晰的判斷出兩種抗體的含量和分佈。
5、反差染色法 為了減少非特異性染色的運用,加強特異性免疫熒光的對比強度,對於某些組織的標本常見的方法是反差染色法,一般會以牛蛋白的白作為陳染,故名思議,反襯標記物的靜電荷強,能夠有效抑制非特異性染色,當伊文思藍進入到染色體中時,會發出橙色的光,也就襯托出特異抗體的黃綠色熒光。
結論
總之,免疫熒光技術是標記免疫技術中最早的一種技術,把熒光免疫法按照不同的體系和測量方法如果進行進一步劃分,還可以繼續細分到若干種,在具體的臨床試驗中,由於一般的熒光技術在測定中的成本比較高,所以對其的判定也有一定的難度,但其與其他免疫方面相比,譬如和放射免疫技術相比,其在應用中有更大的發展空間,本文主要通過幾種研究方法對免疫熒光技術進行了分析探索,並且透視出免疫熒光技術的具體應用和前景,並且也希望免疫熒光技術這種古老又先進的技術能夠得到更好的發展。老而年輕的技術將會具有熒光技術這種
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