顯微鏡的使用方法和注意事項
利用自然光源鏡檢時,最好用朝北的光源,不宜採用直射陽光;利用人工光源時,宜用日光燈的光源。
鏡檢時身體要正對實習臺,採取端正的姿態,兩眼自然張開,左眼觀察標本,右眼觀察記錄及繪圖,同時左手調節焦距,使物象清晰並移動標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時,液體或油易流出,既損壞了標本,又汙染載物臺,也影響檢查結果。
鏡檢時應將標本按一定方向移動視野,直至整個標本觀察完畢,以便不漏檢,不重複。
顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉換及光線的調節。觀察寄生蟲標本時,光線調節甚為重要。因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等,均為自然光狀態的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無色透明,而低倍、高倍接物鏡轉換較多,故須隨著鏡檢時對不同標本和要求,需要隨時調節焦距和光線,這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下,染色標本光線宜強,無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強。
1. 對光:
***1***將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線。
***2***撥動反光鏡,調節至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面,光源強時用平面,較暗時用凹面,需要強光時,將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時,將聚光器降低,或光圈適當縮小。
***3***將待觀察的標本置載物臺上,轉動粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。於轉動粗調節器的同時,須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離。
***4***左眼於接目鏡觀察,同時左手轉動粗調節,使鏡筒徐徐上升以調節焦距,使視野內的物象看到上時即停,再調微調節器,至標本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線的調節:
顯微鏡一般具有三個接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定於接物鏡轉換盤孔中。觀察標本時,先使用低倍接物鏡,此時,視野較大,標本較易查出,但放大倍數較小***一般放大100倍***,較小的物體不易觀察其結構。高倍接物鏡放大的倍數較大***一般放大400倍***,能觀察微小的物體或結構。
寄生蟲的蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡。組織細胞內的原蟲,則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準確鑑定所見的物體或其內部構造時,則轉高倍鏡觀察。使用油鏡觀察,一般加一滴油後直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察。
3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別:
***1***標明放大倍數10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。
***2***低倍鏡最短,高倍鏡較長,油鏡最長。
***3***鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。
***4***油鏡頭上常刻有黑色環圈,或“油”字。
4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法:
***1***光線對好後,移動推進器尋找需要觀察的標本。
***2***如標本的體積較大,不能清楚查見其構造因而不能確認時,則將標本移至視野中央,再旋轉高倍接物鏡於鏡筒下方。
***3***旋轉微調節器至物象清晰為止。
***4***調節聚光器及光圈,使視野內的物象達到最清晰的程度。
5. 油鏡的使用方法:
***1***原理:使用油鏡觀察時,需加香柏油,因為油鏡需要進入鏡頭的光線多,但油鏡的透氣孔最小,這樣進入的光線就少,物體不易看清楚。同時又因自玻片透過的光線,由於介質***玻片-空氣-接物鏡***密度***玻片:n=1.52,空氣:n=1.0***不同而發生了折射散光,因此射入鏡頭的光線就更少,物體更看不清楚。於是採用一種和玻片折光率相接近的介質如香柏油,加於標本與玻片之間,使光線不通過空氣,這樣射入鏡頭的光線就較多,物象就看得清楚。
***2***油鏡的使用:
a.將光線調至最強程度***聚光器提高,光圈全部開放***。
b.轉動粗調節器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴***不要過多,不要塗開***於接物鏡正下方標本上。
c.轉動接物鏡轉換盤,使油鏡頭於鏡筒下方。
d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀察下,轉動粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內,輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉動粗調節器,使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。
f.轉動微調節器,使視野物象達到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動推進器,並轉動微調節器以觀察標本。
h.標本觀察完畢後,轉動粗調節器將鏡筒升起,取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦淨。
6. 注意事項:
***1***使用顯微鏡之前,應熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法,特別應掌握識別三種接物鏡之特徵。
***2***寄生蟲學實習中所觀察的標本,大多數為無色和顏色較淺,因此必須注意光線的調節。
***3***新鮮標本觀察時,須加蓋玻片,以免標本因蒸發而乾燥變形或汙染侵蝕接物鏡,同時可使標本表面勻平,光線得以集中,有利於觀察。