飼養層和滋養層細胞的區別是什麼
飼養層和滋養層細胞有著很大的區別,那麼呢?下面是小編精心為你整理的飼養層和滋養層細胞的區別,一起來看看。
飼養層和滋養層細胞的區別
滋養層細胞
在胚胎髮育成桑椹胚後,桑椹胚進一步發育,細胞開始出現分化。聚集在胚胎的一端,個體較大的細胞,稱為內細胞團inner cell mass,ICM,將來發育成胎兒的各種組織,而沿透明帶內壁擴充套件和排列的,個體較小的細胞,稱為滋養層細胞,它們將來發育成胎膜和胎盤。
滋養層為哺乳類早期胚泡壁的單層細胞所形成的薄膜。是因為以後從母體攝取胎兒營養起重要作用而有此名。滋養層 trophoblast 為哺乳類早期胚泡壁的單層細胞所形成的薄膜。是因為以後從母體攝取胎兒營養起重要作用而有此名。哺乳動物圍繞胚泡形成的胚外層上皮。將來形成絨毛的外層,和母體組織共同組成胎盤。
基因診斷時,通常取少量滋養層細胞診斷是否患有遺傳病,這樣不會影響胎兒發育。
飼養層細胞
所謂飼養層細胞就是指一些特定細胞如顆粒細胞、成纖維細胞、輸卵管上皮細胞等已在體外培養的細胞,經有絲分裂阻斷劑常用絲裂黴素處理後所得的細胞單層。是細胞培養,尤其是胚胎幹細胞培養常用的生長增值促進劑和分化抑制劑。
比較常用的飼養層細胞就是胚胎成纖維細胞,即教材上所說的。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損以及骨創傷的修復有著十分重要的作用。
成纖維細胞胞體較大,胞質弱嗜鹼性,胞核較大呈橢圓形,染色質疏鬆著色淺,核仁明顯。電鏡下,其胞質可見豐富的粗麵內質網、遊離核糖體和發達的高爾基複合體,表明它具有合成和分泌蛋白質的功能。成纖維細胞尚可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質。成纖維細胞胞體較大,胞質弱嗜鹼性,胞核較大呈橢圓形,染色質疏鬆著色淺,核仁明顯。電鏡下,其胞質可見豐富的粗麵內質網、遊離核糖體和發達的高爾基複合體,表明它具有合成和分泌蛋白質的功能。成纖維細胞尚可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質。
各種創傷均會造成不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損,必須通過細胞增生和細胞間基質的形成來進行組織修復。在此修復過程中,成纖維細胞起著十分重要的作用。
飼養層細胞和滋養層細胞的差別
在正常機體內,細胞除了獲得一些血液來的營養外,還在細胞與細胞之間互換特殊的物質,用於分裂分化和營養等。因而,在細胞體外培養中,除了正常的培養基外,先培養一層特殊的細胞,然後再在其上接種要實驗的細胞,這樣更能模擬體內環境。這些特殊的細胞就是飼養層細胞,通常是成纖維類細胞,這些細胞可以提供實驗細胞更好的營養,有的分化研究則是必須有飼養層細胞。
飼養層細胞的影響因素
飼養層的影響,主要體現在飼養層種類、絲裂黴素處理飼養層的時間、飼養層細胞的代數和飼養層細胞的密度等。動物種類不同對飼養層種類的要求也不同。
飼養層種類
STO PMEF: 對各種動物都較適宜,,但最可靠的方法還是根據動物種類篩選最佳飼養層為宜。有研究表明,PMEF比STO更適合用於小鼠ES胚胎幹細胞的培養。
UE子宮上皮細胞
BRL大鼠肝細胞等
動物種類
需要經過篩選來確定最適宜該種動物ES分離克隆的飼養層
絲裂黴素處理滋養層的時間
目前絲裂黴素常用有絲分裂阻斷劑處理時間在小鼠成纖維細胞上一般要求為:在37攝氏度,5%二氧化碳飽和溫度的條件下處理24h,時間過短達不到預定目的,成纖維細胞不能被成功地抑制住,時間過長則使細胞老化,活性下降,分泌因子的能力降低,從而直接影響ES細胞增殖和分化的抑制。同時處理完的清洗工作也很重要,一般要求用無鈣鎂PBS沖洗4~5遍,以確保絲裂黴素的徹底清除。
飼養層細胞的代數及密度
以小鼠成纖維細胞為例,選3~5代,密度為10^6-10^7個/ml為宜,代數過低所含雜細胞太多,代數過高則細胞活力降低。
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