有關獨子藤中主要藥性成分的測試

　　儀器與試藥

　　儀器

　　Shimadzu LC-10AT型高效液相色譜儀（日本島津公司），SPD-10AT型紫外-可見檢測器（日本島津公司），HW-2000色譜工作站；Millipore溶液過濾器；Millipore 0.45 μm濾膜；AY120電子分析天平（Shimadzu公司）；RE-52A旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）。

　　試藥

　　雷公藤紅素對照品（自制，經HPLC法測定純度≥98%）；獨子藤於2008年10月採自廣東省陽春市，由廣東藥學院李書淵教授鑑定為獨子藤Celastrus monospermus Roxb.;矽膠（柱層析矽膠，青島海洋化工有限公司）；甲醇為色譜純；水為超純水；其餘試劑均為分析純。

　　方法與結果

　　供試品溶液的製備

　　取獨子藤藥材適量，粉碎過40目篩，精密稱取10.0 g，裝入100 mL帶塞三角瓶中，加入三氯甲烷超聲提取3次，每次50 mL，每次30 min。靜置，濾取上清液，旋轉蒸發儀上濃縮至幹。稱取4.0 g矽膠裝柱（1.5 cm×10 cm），以三氯甲烷1 mL超聲溶解樣品，上樣。先以三氯甲烷50 mL進行洗脫，棄去洗脫液，再用三氯甲烷-甲醇（體積比95∶5）100 mL洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，旋轉蒸發儀上濃縮至幹。殘渣用甲醇溶解並定容於50 mL容量瓶中，0?45 μm微孔濾膜濾過。平行操作5份，作為1~5號供試品溶液。

　　線性關係的考察

　　分別精密吸取“2.2”項下對照品貯備液1、2、3、4、5 mL置於5 mL容量瓶中，分別用甲醇溶解並定容，搖勻，製得系列對照品溶液。依次取上述溶液各20 μL進樣，依法測定。以雷公藤紅素的峰面積積分值（A）為縱座標，質量濃度（ρ）為橫座標繪製標準曲線，得迴歸方程為A=5.5886×103ρ-2.0127×104（r=0.999 1）。結果表明，雷公藤紅素在40~200 μg·mL-1範圍內與峰面積呈良好線性關係。

　　精密度試驗

　　精密吸取同一雷公藤紅素對照品溶液20 μL，連續進樣6次，測得雷公藤紅素的`峰面積RSD為1?96%，結果表明儀器精密度良好。取同一供試品溶液，分別於0、2、4、6、8、12 h進樣，依法測定，結果雷公藤紅素峰面積的RSD為2?98%，表明供試品溶液在12 h內穩定。取同一批次的獨子藤藥材，稱取5份，按“2.3”項下方法處理並進樣測定，結果雷公藤紅素峰面積的RSD為2.59%，表明本方法重複性良好。

　　加樣回收率試驗

　　取獨子藤藥材6份，各5 g，精密稱定，分別按低、中、高不同質量精密加入雷公藤紅素對照品，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，依法測定，計算回收率，結果見表1。雷公藤紅素為木栓烷型三萜類化合物，是雷公藤片、雷公藤多苷片等治療類風溼病製劑的有效成分之一，主要來源於中藥雷公藤的根皮，具有抗炎、免疫抑制及抗腫瘤等多種藥理活性[3]。中美科學家於2006年聯合發現雷公藤紅素的抗癌新機制[4]，引發了雷公藤紅素抗癌活性研究的熱潮。我們在獨子藤的化學成分研究中發現該植物根中富含雷公藤紅素，是一種潛在的雷公藤紅素植物資源，具有重要開發價值。但至今尚未見有關獨子藤中雷公藤紅素含量測定的文獻報道。本文建立了獨子藤中雷公藤紅素的含量測定方法，對合理開發獨子藤植物資源、促進雷公藤紅素的深入研究，均具有重要意義本文方法測得獨子藤中雷公藤紅素的平均質量分數為0.055 5%，相對較高，提示可將獨子藤作為雷公藤紅素的藥用植物資源加以開發利用，具有重要意義。且雷公藤紅素的毒性很大，建立並完善雷公藤紅素的含量測定方法，亦有助於安全合理地利用獨子藤藥材。